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山梨醇含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

點(diǎn)擊次數(shù)：1389　日期：2016/4/26 9:14:23

 
山梨醇含量試劑盒說(shuō)明書(shū)
                                                                                             分光光度法  50管/48樣
測(cè)定意義：
山梨醇廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是糖運(yùn)輸形式之一，而且與生物
抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此，在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測(cè)山梨醇含
量變化。
測(cè)定原理：
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物，在655nm波長(zhǎng)有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃保存。
山梨醇的提�。�
按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.2g組織，加入2mL
蒸餾水），研磨成勻漿，置沸水浴中煮沸10分鐘（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，8000g，
常溫離心10min，取上清液待測(cè)。
測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至655nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表（在 EP管中依次加入下列試劑）：
試劑（μL）      空白管          測(cè)定管
試劑                       150               150
試劑二               140              140
樣本                                      1000
蒸餾水                  1000
混勻后室溫靜置15min，8000g，常溫離心10min，取上清液測(cè)655nm下吸光值A，計(jì)算ΔA=A
測(cè)定管-A空白管�？瞻坠苤灰鲆还�。
山梨醇含量計(jì)算：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為 y = 0.352x - 0.002；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。
2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算
山梨醇含量（mg /g鮮重）＝[(ΔA＋0.002)  ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計(jì)算
山梨醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷Cpr
V1：加入樣本體積，1mL；V2：加入提取液體積，2 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本質(zhì)量，g
 
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原創(chuàng)作者：青島捷世康生物科技有限公司

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